1978年8月21日，於毅生於山東省青島市，畢業於上海戲劇學院電視藝術系，現在是北京完美建信影視文化有限公司簽約藝人。據悉於毅已經結婚，妻子被保護的很好，並沒有曝光，兩人育有一子，據了解，曾在拍攝靈魂擺渡系列劇時於毅妻子曾探過班。

2001年，於毅正式出道，參與拍攝第一部電視劇作品《摺扇探花》，在劇中飾演沈西銘。

2002年聯合張庭、任達華主演青春劇《壯志雄心》，飾演劉輝。

2003年搭檔林心如、陸毅主演代都市情感時裝勵志劇《男才女貌》，飾演趙磊。   

2004年與孫興、崔智友合作主演電視劇《101次求婚》，在劇中飾演孫興的弟弟鄭金元。同年與黃曉明、于娜合作主演內地時裝劇《女才男貌》，飾演曾偉志。

2005年搭檔林峯、陳怡蓉主演時裝愛情劇《愛情新呼吸》，飾演理查一角。

2006年參與拍攝童蕾、郭曉冬領銜主演的電視劇《誰懂我的心》，飾演邵永康的哥哥羅一陽。

2007年搭檔霍建華、秦嵐主演電視劇《傷城之戀》，飾演江白。

2008年聯合劉之冰、孫寧領銜主演電視劇《面子》，在劇中飾演趙博風。同年在連諫執導的懸疑劇《生死諾言》中飾演陸天揚一角。在姚芊羽、保劍鋒主演的電視劇《我是一棵小草》中飾演岳峰。

2009年聯合霍建華、張萌主演懸疑推理劇《唐琅探案》，飾演榮天。 

於毅個人資料簡介 於毅寫真照

2010年與苗僑偉、朱泳騰合作主演都市情感勵志劇《金枝玉葉》，飾演杜川。同年在張國立、唐國強主演的電視劇《風雨同舟》中飾演王龍一角。

2011年與吳秀波、張嘉譯領銜主演首部醫療劇《心術》，在劇中飾演谷超華。同年參與拍攝胡靜、陳楚河主演的民國宅斗戲《笑紅顏》，飾演蘇明利。與黃海冰、張萌主演建黨90周年獻禮劇《開天闢地》，在劇中飾演汪精衛一角。  

2013年搭檔霍思燕、張曉龍主演懷舊情感劇《幸福在哪裡》，飾演腹黑反派韓江川。同年在胡靜、翁虹主演的電視劇《淚灑女人花》中飾演高立伯一角。10月憑藉戰爭劇《打狗棍》中二丫頭一角，獲得了觀眾最喜愛的角色人物獎。  

2014年搭檔楊志剛、肖茵領銜主演年代奇大劇《勇敢的心》，飾演趙舒城。同年主演的電視劇《靈魂擺渡》《絕地槍王》也相繼播出。

2015年，繼續主演《靈魂擺渡》系列網劇的第二部《靈魂擺渡2》，並演唱同名主題曲《靈魂擺渡》，以及為該劇創作片尾曲《君生吾未生》。同年，主演由常曉陽執導的都市情感劇《轉身遇到你》；同年3月，再度與常曉陽執導合作，與童瑤、遲帥等人共同主演30集當代都市情感題材電視劇《我的麻辣女友》。

2016年，主演母愛主題劇《娘道》，於毅在劇中一人分飾兩角，扮演一對出生大戶人家，但性格命運迥異的孿生兄弟；同年11月，主演的《靈魂擺渡》系列季播劇的最終季《靈魂擺渡3》在愛奇藝播出。

於毅個人資料簡介 網路劇靈魂擺渡劇情介紹 於毅飾演趙吏劇照

《男才女貌》《心術》《打狗棍》等多部影視劇的內地男演員於毅，憑藉出色的演技將各個人物形象演繹得恰到好處。（網易娛樂評）

於毅憑藉其紮實的表演功底以及對角色的理解和詮釋方式，將愛憎分明、殺敵報國的熱血英雄人物“二丫頭”很好地展現在了觀眾面前，令觀眾稱讚。（新華網評）

從《打狗棍》到《勇敢的心》再到後來的《絕地槍王》，很多的槍戰戲、爆破戲，讓於毅完成了勇敢的蛻變。於毅不光戲演的不錯還是個很會唱的藝人，曾為主演的多部電視劇獻聲演唱主題曲和片尾曲，唱功不遜色於專業歌手。他不斷突破自己，不但出演電視劇，參演音樂劇，話劇舞台他也常亮相演出。（新浪娛樂評）

在唱歌方面，於毅演唱的《靈魂擺渡》同名主題曲用搖滾的態度淋漓盡致地宣洩情緒。從《君生吾未生》中的中國風戲曲說唱演繹，到《靈魂擺渡》中的搖滾，能在各種曲風之間游轉自如，展現了其音樂劇功底。（網易娛樂評）